Активность глюкоцереброзидазы и уровень α-синуклеина в крови у пациентов с GBA1-ассоциированной болезнью Паркинсона и бессимптомных носителей мутаций в гене GBA1

Полный текст

Введение

Болезнь Паркинсона (БП) — это распространённое нейродегенеративное заболевание, характеризующееся гибелью дофаминергических нейронов головного мозга и ассоциированное с агрегацией в них белка α-синуклеина. В основном БП является спорадическим заболеванием, однако в 10% случаев наблюдается отягощённый семейный анамнез. Описан ряд генов, мутации в которых приводят к развитию наследственных форм БП [1, 2]. Мутации в гене GBA1 являются фактором высокого риска БП и приводят к развитию GBA-ассоциированной БП (GBA-БП) с распространённостью до 10% среди пациентов с БП в зависимости от популяции [3–5].

Ген GBA1 кодирует лизосомный фермент глюкоцереброзидазу (GCase), который участвует в расщеплении лизосфинголипида глюкозилцерамида на глюкозу и церамид. Биаллельные мутации в гене GBA1 приводят к развитию редкого аутосомно-рецессивного заболевания — болезни Гоше, сопровождающейся снижением активности GCase до 5–30% в зависимости от типа мутаций, а также накоплением её субстрата [3, 6, 7]. При гетерозиготном носительстве мутаций в гене GBA1 как у GBA-БП, так и у бессимп-томных носителей мутаций в данном гене (GBA-носители) также наблюдается снижение ферментативной активности GCase и повышение концентрации лизосфинголипида глюкозилцерамида, но данные нарушения выражены в меньшей степени по сравнению с пациентами с болезнью Гоше [8–10]. Следует отметить, что не у всех носителей мутаций в гене GBA1 происходит манифестация БП в течение жизни, и механизм патогенеза заболевания остаётся неясным.

В настоящее время предполагается двунаправленное влияние дисфункции GCase на уровень α-синуклеина по механизму прямой–обратной связи [11, 12]. В экспериментах in vitro выявлено, что α-синуклеин способен напрямую взаимодействовать с GCase, приводя к снижению её активности [13].

В ряде других исследований показано, что дисфункция GCase может приводить к накоплению α-синуклеина в нейронах, полученных из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток [11]. У модельных животных с дисфункцией GCase [14], а также в дофаминергических нейронах, полученных из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, и мононуклеарных клетках периферической крови пациентов с GBA-БП [15, 16] и болезнью Гоше [15, 17] был выявлен повышенный уровень α-синуклеина.

Цель работы — оценить уровень α-синуклеина в CD45⁺-клетках и активность GCase в крови пациентов с GBA-БП, GBA-носителей, сБП и группы контроля, а также корреляцию между данными показателями в исследуемых группах.

Материалы и методы

Группы, включённые в исследование

В исследование были включены пациенты с GBA-БП (гетерозиготные носители мутаций в гене GBA1; n = 25) и сБП (n = 147), GBA-носители (n = 16) и группа контроля (n = 154). Постановка диагноза производилась на основании критериев Британского банка мозга [18] и Международного сообщества по двигательным расстройствам [19]. Пациенты с БП проходили обследование в Институте мозга человека им. Н.П. Бехтеревой РАН и Первом Санкт-Петербургском государственном медицинском университете им. акад. И.П. Павлова. В исследование были включены пациенты с сБП, ранее не принимавшие препараты L-ДОФА. Пациенты с GBA-БП получали терапию L-ДОФА.

Группа GBA-носителей (n = 16, неврологически здоровые лица с гетерозиготными мутациями в гене GBA1) была составлена из родственников пациентов с болезнью Гоше. Наличие мутаций было подтверждено прямым секвенированием ДНК по Сэнгеру. Все участники исследования проходили клинико-неврологическое обследование для исключения нейродегенеративных заболеваний. Лица контрольной группы (n = 154) проходили обследование в Первом Санкт-Петербургском государственном медицинском университете им. акад. И.П. Павлова. У всех пациентов с сБП и лиц контрольной группы отсутствие распространённых мутаций GBA1 (L444P, N370S, E326K) было подтверждено с помощью полимеразной цепной реакции и рестрикционного анализа [5]. Контрольная и экспериментальные группы не различались по возрасту и полу.

Все процедуры, выполненные в исследованиях с участием людей, соответствуют этическим стандартам Национального комитета по исследовательской этике и Хельсинкской декларации или сопоставимым нормам этики. От каждого участника исследования было получено информированное добровольное согласие. Протокол исследования одобрен Этическим комитетом Института мозга человека им. Н.П. Бехтеревой РАН (протокол № 1 от 26.11.2020).

Определение уровня α-синуклеина в CD45⁺-клетках

CD45⁺-клетки выделяли из 8 мл периферической крови центрифугированием в градиенте плотности фиколла («Ficoll-Paque PLUS», «GE Healthcare») с последующей магнитной сортировкой с использованием микрочастиц, конъюгированных с антителами к CD45⁺-рецепторам, и колонок miniMACS типа MS («Miltenyi Biotec»). Клеточную суспензию аликвотировали и замораживали при –70º С.

Клетки лизировали с помощью набора для экстракции общего белка «Chemicon» («Millipore»). Концентрацию общего белка измеряли с помощью набора «Pierce BCA» («Thermo Scientific»). Уровень α-синуклеина в CD45⁺-клетках определяли с помощью иммуноферментного анализа с использованием набора для детекции α-синуклеина человека («Thermo Fisher Scientific»). Все образцы были выровнены по количеству общего белка (6 мкг) и оценены в 3 повторах. Оптическую плотность измеряли с помощью микропланшетного спектрофотометра «XMark» («Bio-Rad»).

Измерение активности GCase в крови

Активность GCase определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией в сухих пятнах крови [10]. Ферментативную активность оценивали путём измерения концентрации продукта, полученного в результате реакции фермента с субстратом: фермент (Ф) + субстрат (С) + (ФС комплекс) Ф + продукт.

Масс-спектрометрический анализ проводили на тандемном масс-спектрометре «API 3200 QTrap» («ABSciex») в режиме мониторинга множественных реакций. Активность рассчитывали исходя из предположения, что количество полученного продукта прямо пропорционально активности ферментов лизосом в сухом пятне крови.

В качестве контроля использованы образцы с известным уровнем активности ферментов, полученных из Центра по контролю и профилактике заболеваний США, которые были добавлены в каждый планшет.

Статистический анализ

Статистический анализ проводили с использованием программного обеспечения R (версия 3.6.2). Соответствие полученных данных нормальному распределению было проверено с помощью критерия Шапиро–Уилка. Попарное сравнение вариационных рядов осуществляли с использованием U-критерия Манна–Уитни. Значения p < 0,05 считали статистически значимыми. Корреляцию между исследуемыми группами оценивали с использованием коэффициента Спирмена. Клинические и экспериментальные данные представлены как среднее значение ± стандартное отклонение (M ± SD) и медиана (минимум–максимум) соответственно.

Результаты

Клинические характеристики пациентов и лиц контрольной группы, участвовавших в исследовании, представлены в таблице. Поскольку риск БП у носителей мутаций N370S, L444P гена GBA1 повышен в 6–7 раз, а в случае мутации E326K — в 2 раза, уровень α-синуклеина и активность GCase были проанализированы как в группе пациентов с мутациями N370S, L444P (GBA-БП — N370S, L444P), так и в общей группе, включающей пациентов с БП с мутациями N370S, L444P и E326K (все_GBA-БП).

 

Клинические характеристики и изучаемые параметры индивидуумов исследуемых групп

Clinical characteristics and study parameters of participants in study groups

Параметр | Parameter	Контроль Control	сБП | sPD	GBA-носители GBA carriers	GBA-БП, мутации | GBA-PD, mutations
				N370S, L444P, E326K	N370S, L444P
N	154а 68g	147а 40б	16а 15g	25	15
Пол (м/ж) Gender (M/F)	75/79а 32/36g	61/86а 16/24g	5/11а 5/10g	15/10	9/6
Возраст, лет Age, years (M ± SD)	62,02 ± 9,06а 59,68 ± 8,76g	63,36 ± 9,26а 61,57 ± 8,56g	53,93 ± 8,19а 53,26 ± 8,31g	61,74 ± 9,91	62,71 ± 11,19
Возраст начала, лет Age of onset, years (M ± SD)	N/A	59,32 ± 10,00а 57,17 ± 8,91g	N/A	57,32 ± 9,91	57,00 ± 11,20
Мутации в гене GBA1 GBA1 mutations	N/A	N/A	5 L444P/Nа, g, 4 N370S/Nа, g, 1 L326P/Nа, g, 1 N227S/Nа, g, 1 R159W/Nа, g, 4 E326K/Nа/3 E326K/Ng	8 L444P/N, 7 N370S/N, 10 E326K/N	8 L444P/N, 7 N370S/N
Уровень α-синуклеина, нг/мл Levels of α-synuclein, ng/mL	6,56 (0,46–45,70)	9,28 (0,63–65,60), p* = 0,0002	12,80 (1,22–41,30) p* = 0,032	10,80 (0,68–51,40), p* = 0,0043	12,90 (2,92–37,50), p* = 0,0014
Активность Gcase, мМ/л/ч Gcase activity, mM/L/h	8,14 (1,55–32,10)	7,60 (3,33–14,70)	4,67 (2,33–10,40) p* = 3,9e-05 p** = 0,003	4,28 (1,51–13,20) p* = 5,1e-06 p** = 0,00027	4,40 (1,51–6,13) p* = 1,5e-06 p** = 9,9e-05

Примечание. ^aИсследование по оценке уровня α-синуклеина; ^gисследование по оценке активности GСase. N/A — не определяли. *p — по сравнению с контролем; **p — по сравнению с сБП.

Note. ^aAssay of α-synuclein levels; ^gAssay of GCase activity. N/A, not assessed. *p compared to the control group; **p compared to sPD patients.

 

В результате проведённого исследования показано, что уровень α-синуклеина в CD45⁺-клетках пациентов групп все_GBA-БП и GBA-БП, а также у GBA-носителей был повышен по сравнению с индивидуумами контрольной группы (р = 0,0043; р = 0,0014; р = 0,032 соответственно; таблица). Уровень α-синуклеина также был повышен у пациентов с сБП по сравнению с контрольной группой (р = 0,0002). У пациентов с GBA-БП, а также у GBA-носителей наблюдалось снижение активности GСase по сравнению с пациентами с сБП (p = 0,0003; p = 0,003) и контрольной группой (p < 0,0001; p < 0,0001; таблица), что согласуется с полученными ранее результатами [2].

Выявлена обратная корреляция между активностью GCase и уровнем α-синуклеина в CD45⁺-клетках в крови у пациентов групп все_GBA-БП (R = –0,53; p = 0,017), GBA-БП (R = –0,78; p < 0,0001), но не в группе GBA-носителей (R = –0,39; p = 0,15; рисунок). В группе пациентов с сБП на грани статистической значимости была выявлена обратная корреляция между активностью GCase и уровнем α-синуклеина в CD45⁺-клетках (R = –0,3, p = 0,057; рисунок). В то же время в контрольной группе корреляции между исследуемыми параметрами не выявлено.

 

Корреляция между уровнем α-синуклеина в CD45⁺-клетках и активностью GСase в крови пациентов групп все_GBA-БП (A; n = 25), GBA-БП (В; n = 15), GBA-носителей (С; n = 15), сБП (D; n = 40) и группы контроля (E; n = 68). По осям абсцисс — уровень α-синуклеина, нг/мл, по осям ординат — активность GСase, мМ/л в час.

Correlation between the level of α-synuclein in CD45⁺ blood cells and GCase activity in the all-GBA-PD group (A; n = 25), the GBA-PD group (B; n = 15), GBA carriers (C; n = 15), sPD patients (D; n = 40) and controls (E; n = 68).Abscissa: level of α-synuclein, ng/mL; ordinata: GСase activity, mM/L/h.

 

Корреляция между уровнем α-синуклеина в CD45⁺-клетках и активностью GСase в крови пациентов групп все_GBA-БП (A; n = 25), GBA-БП (В; n = 15), GBA-носителей (С; n = 15), сБП (D; n = 40) и группы контроля (E; n = 68).

Обсуждение

Молекулярный механизм развития GBA-БП остаётся неизвестным, однако предполагается, что дисфункция GСase и олигомеризация α-синуклеина в клетках могут быть взаимосвязаны. В то же время мало изучен вопрос: снижение активности GСase и накопление лизосфинголипидов, а также изменение уровня α-синуклеина в периферической крови предшествует развитию заболевания у носителей мутаций в гене GBA1 или является следствием развития заболевания. В то же время изучение БП с известной этиологией, а также факторов, предшествую-щих и/или влияющих на развитие заболевания у носителей мутаций в гене GBA1, является крайне важным, поскольку позволит выделить биомаркеры заболевания и сформировать группы риска развития БП среди носителей GBA1-мутаций для включения данной когорты пациентов в клинические исследования с использованием таргетных препаратов, направленных на повышение активности GCase [3].

Нами впервые показано, что на фоне увеличения уровня α-синуклеина и снижения активности GСase в клетках крови пациентов как с GBA-БП, так и GBA-носителей обратная корреляция уровня α-синуклеина и активности GCase была характерна только для пациентов с GBA-БП, но не для GBA-носителей.

Следует отметить, что повышение уровня α-синуклеина, а также снижение активности GCase в периферической крови ранее было выявлено в исследованиях пациентов с БП с мутациями в гене GBA1 [8, 10, 15]. Так, М. Avenali и соавт. обнаружили повышение уровня α-синуклеина в лимфоцитах периферической крови в группе GBA-БП по сравнению с пациентами с сБП и контролем [15]. Ранее нами показано повышение уровня олигомерного α-синуклеина в плазме крови как у пациентов с болезнью Гоше, так и у пациентов с БП с мутациями гена GBA1 и полиморфными вариантами гена GBA1 по сравнению с контролем [9].

В настоящее время обсуждается наличие взаимосвязи между дисфункцией GCase и накоплением белка α-синуклеина [11]. В исследованиях in vitro доказано прямое влияние лизосфинголипидов на агрегацию α-синуклеина [12, 20]. Так, с использованием α-синуклеина, выделенного из дофаминергических нейронов, полученных из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, было показано, что субстрат GCase глюкозилцерамид индуцировал агрегацию α-синуклеина, способствуя превращению его олигомерных форм в токсичные агрегаты определённой конформации [21]. Интересно отметить, что для оценки таких конформеров α-синуклеина в биологических жидкостях организма человека при синуклеинопатиях в последние годы всё чаще применяется метод циклической амплификации белков с нарушенной конформацией [22]. В частности, применение этого подхода позволило М. Shahnawaz и соавт. обнаружить специфические конформеры α-синуклеина в образцах ликвора пациентов с синуклеинопатиями при отсутствии их в контроле [23]. В связи с этим можно предположить, что наблюдаемая нами обратная корреляция активности GCase и уровня α-синуклеина в CD45⁺-клетках крови пациентов с GBA-БП, а также отсутствие её в группе GBA-носителей могут быть обусловлены наличием в биологических образцах пациентов с БП патологических форм α-синуклеина, чувствительных к снижению активности GCase. Обнаруженная нами обратная корреляция между активностью GCase и уровнем α-синуклеина в крови на грани статистической значимости у пациентов с сБП, но не в контрольной группе, также может подтверждать данное предположение.

Данные по активности GCase в крови при сБП носят противоречивый характер [8, 24]. Нами было выявлено отсутствие различий в активности GCase у пациентов с сБП по сравнению с лицами контрольной группы.

В то же время обнаружено увеличение уровня α-синуклеина в CD45⁺-клетках пациентов с сБП по сравнению с контролем, что согласуется с полученными ранее результатами [16]. В последние десятилетия обсуждается, что уровень α-синуклеина периферических тканей может быть использован в качестве потенциального биомаркера БП [25], однако результаты многочисленных исследований противоречивы, что может объясняться различиями в применяемых методах, используемых антителах, а также других сопутствующих проведению эксперимента факторов. Несмотря на показанное в нашем исследовании повышение уровня α-синуклеина в CD45⁺-клетках пациентов с сБП, использование данного маркера для дифференциальной диагностики БП не представляется возможным, поскольку полученные значения перекрываются между исследуемыми группами, а в группе здоровых носителей мутаций в гене GBA1 выявлен даже более высокий уровень α-синуклеина в CD45⁺-клетках, чем у пациентов с сБП. В ранее опубликованных исследованиях по оценке уровня α-синуклеина в мононуклеарных клетках периферической крови не обнаружено различий в группе пациентов с сБП по сравнению с контрольной группой [15, 26, 27]. В связи с этим для оценки влияния уровня α-синуклеина в мононуклеарных клетках периферической крови на развитие и прогрессирование БП необходимо проведение дальнейших исследований.

Следует отметить, что наше исследование обладает рядом как преимуществ, так и недостатков. Основным преимуществом является включение в него бессимптомных носителей мутаций в гене GBA1, что позволило провести сравнительную характеристику исследуемых параметров в группе GBA-носителей с наличием БП и при его отсутствии. Использование гомогенной фракции CD45⁺-клеток периферической крови индивидуумов исследуемых групп для оценки уровня α-синуклеина позволило нивелировать эффект влияния на него гемолиза эритроцитов. Ранее было показано, что при получении мононуклеарных клеток периферической крови с помощью центрифугирования в градиенте плотности фиколла в них может обнаруживаться примесь эритроцитов, содержащих более 99% общего α-синуклеина из всех клеток крови [28]. Кроме того, в наше исследование были включены пациенты с сБП, не принимающие пре-параты L-ДОФА, что позволило исключить потенциальное влияние данных лекарственных средств на экспрессию гена α-синуклеина [29]. Следует отметить, что в большинстве проведённых ранее исследований по оценке уровня α-синуклеина в мононуклеарных клетках крови при БП влияние α-синуклеина эритроцитов, а также приё-ма пациентами с БП L-ДОФА-содержащих препаратов не учитывалось.

Основным ограничением нашей работы является небольшой размер групп GBA-БП и GBA-носителей. Несмотря на то что средний возраст в группах GBA-БП и GBA-носителей не различается, мы не можем исключить возможность того, что у кого-то из GBA-носителей проявятся клинические симптомы БП в течение жизни.

Заключение

Полученные данные о наличии обратной корреляции уровня α-синуклеина и активности GCase в крови носителей мутаций гена GBA1 с БП, но не бессимптомных GBA-носителей позволяют предположить, что изменение уровня α-синуклеина и активности GCase в крови носителей мутаций в гене GBA1 может наблюдаться при появлении клинических проявлений БП.

Об авторах

Антон Константинович Емельянов

Петербургский институт ядерной физики имени Б.П. Константинова НИЦ «Курчатовский институт»; Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова

Email: e_anton_gen@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-3249-7889

канд. биол. наук, с. н. с. лаб. молекулярной генетики человека НИЦ «Курчатовский институт» — ПИЯФ; с. н. с. лаб. медицинской генетики ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова

Россия, Гатчина; Санкт-Петербург

Татьяна Сергеевна Усенко

Петербургский институт ядерной физики имени Б.П. Константинова НИЦ «Курчатовский институт»; Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова

Email: u.tatiana86@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-5132-2283

канд. биол. наук, с. н. с. лаб. молекулярной генетики человека НИЦ «Курчатовский институт» — ПИЯФ; с. н. с. лаб. нанотехнологий ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова

Россия, Гатчина; Санкт-Петербург

Алена Эдуардовна Копытова

Петербургский институт ядерной физики имени Б.П. Константинова НИЦ «Курчатовский институт»; Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова; Сургутский государственный университет

Email: kopytovaalena@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-6557-0253

канд. биол. наук, м. н. с. лаб. молекулярной генетики человека НИЦ «Курчатовский институт» — ПИЯФ; м. н. с. лаб. молекулярной биологии ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова; м. н. с. Медицинского института Сургутского государственного университета

Россия, Гатчина; Санкт-Петербург; Сургут

Ирина Валентиновна Милюхина

Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова; Институт мозга человека имени Н.П. Бехтеревой РАН

Email: milyukhinaiv@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-6433-542X

канд. мед. наук, руководитель Центра нейродегенеративных заболеваний Института мозга человека им. Н.П. Бехтеревой РАН; с. н. с. лаб. медицинской генетики ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова

Россия, Санкт-Петербург; Санкт-Петербург

Алла Аркадьевна Тимофеева

Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова

Email: timmma@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-1661-7753

канд. мед. наук, доцент, руководитель Центра экстрапирамидных заболеваний кафедры неврологии

Россия, Санкт-Петербург

Анастасия Игоревна Безрукова

Петербургский институт ядерной физики имени Б.П. Константинова НИЦ «Курчатовский институт»; Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова

Email: bz.nastya96@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-3939-0758

лаборант-исследователь лаб. молекулярной генетики человека НИЦ «Курчатовский институт» — ПИЯФ; м.н.с. лаб. медицинской генетики ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова

Россия, Гатчина; Санкт-Петербург

Дарья Геннадьевна Кулабухова

Петербургский институт ядерной физики имени Б.П. Константинова НИЦ «Курчатовский институт»; Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова

Email: kulabuhovadarya@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-9700-0095

анд. биол. наук, стажер-исследователь лаб. молекулярной генетики человека НИЦ «Курчатовский институт» — ПИЯФ; м. н. с. медицинской генетики ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова

Россия, Гатчина; Санкт-Петербург

Галина Викторовна Байдакова

Медико-генетический научный центр имени академика Н.П. Бочкова

Email: gb2003@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-8806-5287

канд. биол. наук, в. н. с. лаб. наследственных болезней обмена веществ 

Россия, Москва

Михаил Андреевич Николаев

Петербургский институт ядерной физики имени Б.П. Константинова НИЦ «Курчатовский институт»; Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова

Email: almaflex@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-1952-4678

м. н. с. лаб. молекулярной генетики человека НИЦ «Курчатовский институт» — ПИЯФ; м. н. с. лаб. медицинской генетики ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова

Россия, Гатчина; Санкт-Петербург

Анна Олеговна Лавринова

Петербургский институт ядерной физики имени Б.П. Константинова НИЦ «Курчатовский институт»

Email: lavrinova.anna@gmail.com
ORCID iD: 0009-0007-2824-5762

м. н. с. лаб. молекулярной генетики человека 

Россия, Гатчина

Анастасия Владимировна Кудреватых

Институт мозга человека имени Н.П. Бехтеревой РАН

Email: kudrevatykh91@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-1706-1718

канд. мед. наук, врач-невролог Центра нейродегенеративных заболеваний 

Россия, Санкт-Петербург

Александр Сергеевич Журавлев

Петербургский институт ядерной физики имени Б.П. Константинова НИЦ «Курчатовский институт»; Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова; Сургутский государственный университет

Email: rigold988@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-8495-5581

лаборант-исследователь лаб. молекулярной генетики человека НИЦ «Курчатовский институт» — ПИЯФ; м.н.с. лаб. медицинской генетики ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова; лаборант-исследователь Медицинского института Сургутского государственного университета

Россия, Гатчина; Санкт-Петербург;

Екатерина Юрьевна Захарова

Медико-генетический научный центр имени академика Н.П. Бочкова

Email: doctor.zakharova@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-7938-7196

д-р мед. наук, зав. лаб. наследственных болезней обмена веществ 

Россия, Москва

Софья Николаевна Пчелина

Петербургский институт ядерной физики имени Б.П. Константинова НИЦ «Курчатовский институт»; Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова; Институт экспериментальной медицины

Автор, ответственный за переписку.
Email: sopchelina@hotmail.com
ORCID iD: 0000-0001-7431-6014

д-р биол. наук, зав. лаб. молекулярной генетики человека НИЦ «Курчатовский институт» — ПИЯФ; зав. отделом молекулярно-генетических и нанобиологических технологий ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова; в. н. с. отдела биохимии Института экспериментальной медицины

Россия, Гатчина; Санкт-Петербург; Санкт-Петербург

Список литературы

Дополнительные файлы